蛋白质除盐的方法有哪几种简述其原理?
蛋白质除盐常用的5种脱盐的方法的方法有哪些常用的5种脱盐的方法?如何做能够在除盐常用的5种脱盐的方法的过程中不过分的稀释蛋白质?
答题思路常用的5种脱盐的方法:
首先常用的5种脱盐的方法,当遇到分离纯化题目的时候,我们脑海中先归纳出分离纯化的各种方法以及依据。
根据分子大小不同:透析、超过滤、密度梯度离心、凝胶过滤、SDS-PAGE凝胶电泳。
根据溶解度差别:等电点沉淀、盐溶、盐析、有机溶剂分离沉淀。
根据电荷不同:各种电泳、离子交换层析
选择性吸附和利用对配体特异亲和力的纯法方法:亲和层析。
显然,蛋白质脱盐,是将蛋白质与小分子物质分开。上面的方法中,根据溶解度差别这几种方法还得加盐,与脱盐的目的背道宽举肢而驰。这里面的等电点沉淀能不能行呢?如果原先蛋白质溶液中没有盐,那么我们将pH调整到某个蛋白质等电点,这种蛋白质就可能沉淀下来这时候肯定没有加盐。但是我们现在的体系中是有盐离子的,我们把盐析下来的蛋白质先加少量水慎世溶解出来,这个时候我觉得因为溶液里有盐离子,溶剂的极性比较高,有一定盐溶的效果,所以等电点沉淀并不容易实现。
根据电荷答谈的方法也不应该考虑,因为盐和蛋白质都是带电荷的,不好分离。
应该重点考虑根据分子大小不同的纯化方法。
透析能够分离蛋白质与离子,但是透析的过程中透析液会进入蛋白样品中,造成蛋白质的稀释。
凝胶过滤我们设置凝胶颗粒空隙小于蛋白质直径,这样蛋白质不经过凝胶内部首先被洗脱下来,而离子则进入凝胶颗粒内部。但是在洗脱的过程中蛋白质样品必然会被洗脱液稀释
如何除盐?
1:直接蒸发结晶常用的5种脱盐的方法,可反复几次,将食盐提纯
2常用的5种脱盐的方法:海水中让人觉得缺祥苦和涩并不是只有食猛冲盐,还有其他常用的5种脱盐的方法的很多种元素,最好的办法是直接使用海水淡化膜,将海水淡化
3常用的5种脱盐的方法;氧化钙中的碳酸钙可是直接放在高温下灼烧,伏知搏碳酸钙在高温下会分解成为氧化钙和二氧化碳
分离提纯蛋白质时常需去盐,常用去盐的方法有哪些
蛋白质沉淀的定义: 蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀。 蛋白质沉淀的方法: 盐析法 ——多用于各种蛋白质和酶的分离纯化; 在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同,故可用于对混和蛋白质组分的分离。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以塌李使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,盐析沉淀的蛋白质,经透析除盐,仍保证蛋白质的活性。调节蛋白质溶液的pH至等电点后,再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好。盐析法分为两类,第一类叫Ks分段盐析法,在一定PH和温度下通过改变离子强度实现,用于早期的粗提液;第二种叫b分段盐析法,在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现,用于后期进一步分离纯化和结晶。影响盐析的因素包括:蛋白质浓度、离子强度和类型、PH值、温度等。针对温度这一条,需要强调:在低离子强度或纯水中,蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加。但在高浓度下,蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降。在一般情况下,蛋白质对盐析温度无特殊要求,可在室温下进行,只有某些对温度比较敏感的酶要求在0-四℃进行。 使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意:硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,使用前必须用H二S处理:将硫酸铵配成浓溶液,通入H二S饱和,放置过夜,用滤纸除去重金属离子,浓缩结晶,一00℃烘干后使用。另外,高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性(PH=5.0左右),使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH。 有机溶剂沉淀法 ——多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化; 有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出。该法优点在于:一)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀;二)沉淀不用脱盐,过滤较为容易;三)在生化制备中应用比盐析法广泛。但是,在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。例如酒精消毒灭菌就是如此。因此,操作要求在低温下进行。有机溶剂的选择首先是能和水混溶,使用较多的有机溶剂是乙醇、甲醇、丙酮,还有二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈和二-甲基-二,四戊二醇等。 等电点沉淀法 ——此法单独应用较少,多物衫仿与其它方法结合使用; 两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。如工业上生产胰岛素时,在粗提液中先调PH吧.0去除碱性蛋白质,再调PH三.0去除酸性蛋白质。利用等电点除杂蛋白时必须了解制备物对酸碱的稳定性,不然盲目使用十分危险。不少蛋白质与金属离子结合后,等电点会发生偏移,故溶液中含有金属离子时,必须注意调整PH值。等电点法常与盐析法、有机溶剂沉淀法或其他沉淀方法联合使用,以提高其沉淀能力。 重金属盐沉淀法 ——常用于抢救误服重金属盐中毒的病人; 许多有机物质包括蛋白在内,在碱性溶液中带负电荷,能与金属离子形成沉淀。根据有机物与它们之间的作用机制,可分为羧酸、胺及杂环等含氮化合物类,如铜锌镉;亲羧酸疏含氮化合物类,如钙镁铅;亲硫氢基化合物类,如汞银铅。蛋白质-金属离子复合物的重要性质是它们的溶解度对溶液的介电常数非常敏感,调整水溶液的介电常数(如加入有机溶剂),即可沉淀多种蛋白。沉淀的条件以pH稍大于等电点为宜。罩纤重金属沉淀的蛋白质常是变性的,但若在低温条件下,并控制重金属离子浓度,也可用于分离制备不变性的蛋白质。临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质,抢救误服重金属盐中毒的病人,给病人口服大量蛋白质,然后用催吐剂将结合的重金属盐呕吐出来解毒
除了凝胶层析脱盐的方法,还有什么脱盐的方法?
你要脱盐的物质是什么呀,我讲下岩首蛋白的吧.
1.用透析法,不过这种方法只能用于少量蛋白的脱盐.
2.可以用丙酮沉淀蛋白除盐,因为这种方法是使蛋白变性沉淀下来而除盐,这种方法可能会使部分蛋白丢失或失去活性.
3.盐析,用硫酸铵,氯化启枣运钠等中性盐等沉淀悄梁蛋白而除盐
什么是脱盐水?脱盐有哪些方法?一般工艺流程怎样?
脱盐水(desalted water)是将所含易于除去的强电解质除去或减少到一定程度的水。脱盐水中的剩余含盐量应在1~5 毫克/升之间。
制取脱盐水的方法主要有以下三种:
①蒸馏法,使含盐的水加热蒸发,将蒸气冷凝即得脱盐水;
②离子交换法,使含盐的水通过装有泡沸石或离子交换剂手告的交换柱(见离子交换),钙、镁等离子留在交换柱上,滤过的水为脱盐水;
③电渗析法,借离子交换膜对离子的选择透过性,在外加电场作用下,使两种离子交薯薯大换膜之间的水中的阳、阴离子,分别通过交换膜向阴、阳两极集数竖中。于是膜间区成为淡水区,膜外为浓水区。从淡水区引出的水即为脱盐水。
蒸馏法多用于实验室用来洗刷容器或制备溶液,适用于量不多纯度要求较高场所。离子交换法与电渗析法多用于化工业如锅炉用水可以减少结垢和腐蚀,适用于量大纯度要求不是很高的场所。
水的软化和除盐的基本方法有哪些
去除水中溶解物质的方法主要有软化除盐﹑离子交换﹑吸附和膜分离。
软化就是降低水中Ca2+﹑Mg2+的含量常用的5种脱盐的方法,以防止其在管道设备中结垢。
基本方法有常用的5种脱盐的方法:加热软化法:借助加热将碳酸盐硬度转化成溶解度很小的CaCO3﹑Mg(OH)2
沉淀出来。
药剂软化法:在不加热的条件下常用的5种脱盐的方法,借助化学药剂运纳把钙﹑镁清悄凳盐类(包括非碳酸盐硬度)转化成CaCO3﹑Mg(OH)2
沉淀出来常用的5种脱盐的方法,从而去除绝大部分Ca2+﹑Mg2+。常用药
剂法有:石灰法﹑石灰—纯碱法与石灰—石膏法。
离子交换法:利用离子交换剂将水中的答旅Ca2+﹑Mg2+转化成Na+,而其他成分不改变。
除盐就是减少水中溶解盐类(阴阳离子)总量,方法有:蒸馏法﹑电渗析法﹑离子交换法(应用最广)。